ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА - Медицинская энциклопедия | Медицинский справочник - Медицинский справочник, Медицинская энциклопедия, вики, wiki | Информация о ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА, применение и лечение, где купить лекарство ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА - аптека. Как лечить заболевание, симптомы, ответы на вопросы и что такое ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА, секреты и тайны, вся правда.
Справочник лекарственных препаратов, медицинский справочник болезней | Энциклопедия лекарств | Описание лекарственных средств, фармацевтический справочник

 
 1. Лекарства
 2. Болезни
 3. Диеты
 4. Медицинские статьи
 5. Медицинские термины
 6. Лекарственные травы
 7. Медицинская энциклопедия

ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА

ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА - Медицинская энциклопедия | Медицинский справочник - Медицинский справочник, Медицинская энциклопедия, вики, wiki
В нашей медицинской энциклопедии в разделе Медицинская энциклопедия и Медицинский справочник собрана информация о ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА. Вы сможете узнать что такое ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА в режиме онлайн и совершенно бесплатно. Надеемся Вы не зря посетили наш медицинский справочник и нашли полное описание ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА, нужные симптомы и прочую инфу, наш сайт предоставляет всю информацию бесплатно, но чтобы купить нужное лекарство или вылечить интересующую Вас болезнь, лучше обратитесь к Вашему лечащему врачу, фармацевту или обратитесь в местную поликлинику. Вся представленная информация о ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА, лишь для ознакомления и самостоятельное лечение Мы не рекомендуем.



Loading
Медицинская энциклопедия / Медицинская энциклопедия / ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА

ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА


ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА. Содержание: Методика гистологич. исследований..... 242 Теоретические основы Г. т........... 246 Гистохимия................... 253 Краски, употребляемые в Г. т......... 258 Гистологическая техник а—техника изучения микроскоп, строения клеток, тканей и органов растений и животных. Отдел Г. т., посвященный строению клетки, обозначается обычно как цитологическая техника.—Наиболее простым и во многих случаях чрезвычайно ценным методом Г. т. является изучение нативного материала, т.е. живых или свежих, переживающих гист. элементов или клеток. Это возможно однако лишь в случае очень мелких и прозрачных объектов, напр. клеток крови и др., а также тонких тканевых пленок вроде брыжейки низших позвоночных и т. п. Нередко применяется и метод расщипывания свежих тканей на отдельные элементы, напр. при изучении мышцы, нервн. волокон и т. п. Во многих случаях непосредственное исследование живой ткани может дать чрезвычайно много и служит основой для правильной оценки результатов обычных методов Г. т. Наблюдение в живом состоянии дает нередко много для понимания физиологического значения различных структур, например скелетных и сократительных элементов и т. п. Однако в большинстве случаев непосредственное изучение нативного материала затруднено либо непрозрачностью, либо оптической однородностью изучаемых объектов. Последнее зависит от того, что лучепреломление и лучепоглощение различных гист. структур крайне близко; поэтому их оптическая диференцировка б. ч. крайне трудна. Однако, применяя т. н. фиксаторы, вызывающие свертывание белковых и др. составных частей протоплазмы, можно достичь того, что различные тканевые элемен- ты образуют коагуляты, имеющие неодинаковый коефициент преломления. Это дает возможность проявить многие гисто- и цитологические элементы, напр. ядра, ядрышки. волокна, очень простыми способами, напр. прибавлением уксусной или осмиевой кислоты и т. п. Однако получающаяся при этом оптическая диференцировка далеко не совершенна, и в большинстве случаев наиболее тонкие морфологич. детали могут быть выявлены лишь с помощью разных окрасок. Окрашивание возможно только в случае мертвых тканей, т. к. живые клетки совершенно не красятся, а могут лишь накоплять краски в вакуолях протоплазмы (см. Витальная окраска). Поэтому клетки должны быть предварительно законсервированы или зафиксированы, т. е. умерщвлены, но так, чтобы по возможности не нарушить естественных морфолог, соотношений и не вызвать грубых артефактов (см.). Гистолог. объекты рассматриваются под микроскопом гл. обр. в проходящем свете,—реже—в поляризованном (падающим светом практически не пользуются). Для некоторых спец. целей применяется микроскопия в темном поле зрения. Для исследования в проходящем свете объекты должны быть достаточно прозрачны. Поэтому задачей Г. т. является приготовление очень тонких препаратов. Т. о. Г. т. сводится к фиксации клеток или тканей, к приготовлению срезов и к их окрашиванию. При изучении отдельных гист. элементов, свободных или полученных путем расщипывания, можно обойтись тотальными препаратами, минуя приготовление срезов. Методика гиет. исследований. Фиксация. Цель фиксации—быстрое умерщвление ткани путем свертывания белка (и отчасти липоидов) при возможном сохранении естеств. морфологии строения. Первоначально значение фиксации видели в уплотнении мягких тканей с тем, чтобы из них можно было делать тонкие срезы. Однако известны многие уплотняющие вещества, хотя и свертывающие белок, но все же непригодные в качестве фиксаторов, так как они вызывают большие структурные изменения. Фиксаторами являются прежде всего—соли тяжелых металлов: Hg, Сг, Os, Pt; из кислот—пикриновая, уксусная, трихлор-уксусная, затем спирт, ацетон, формол и некоторые другие вещества. Только три последние употребляются как самостоятельные фиксаторы, в большинстве, же случаев применяются самые разнообразные смеси, так как т. о. достигаются наилучшие результаты. Наиболее распространены жидкости Флемминга, Ценкера и Буена. Пробыв в фиксаторе нек-рое время, от нескольких мин. до нескольких дней (каждый фиксатор имеет свой оптимум времени), кусочки тканей должны быть в большинстве случаев отмыты от фиксирующей жидкости. Это достигается промыванием в воде или в спирте.—Этим заканчивают 1-ю операцию и приступают к приготовлению срезов. Но если в кусочках имеются твердые ткани, как кость, хитин или же пат. отложения извести, то их предварительно размягчают; так, известковые элементы растворяются кислотой (см. Декальцинация), хитин размягчается диафанолом (двуокись хлора, растворенная в уксусной к-те) или кедровым маслом. Простейшим методом приготовления срезов является разрезание кусочков от руки обычной бритвой для бритья. Этот метод очень широко применяется в ботанике и до сих пор. На ботанических объектах такое изготовление срезов без дальнейшей обработки (и даже без фиксадии) возможно потому, что растительные ткани относительно очень плотны; в случае животных объектов этот метод применяется крайне редко. На первых порах развития техники срезов применяли разрезание в печени, при чем кусочек зажимался между 2 пластинками свежей печени, и разрез проводился через всю массу. В наст, время для приготовления срезов пользуются микротомами (см.), позволяющими делать очень тонкие срезы и регулировать их толщину. Наиболее простой способ — резка замороженных кусочков. Кусочек ткани, фиксированный в формоле или других фиксаторах, замораживается (эфиром или жидкой углекислотой) и т. о. примерзает к столику специального микротома. Промерзшие ткани настолько тверды, что позволяют микротомной бритве разрезать их на очень тонкие срезы (до 5 ft). Срезы тотчас же переносятся в воду, где они оттаивают. Недостатки этого метода: 1) срезы нек-рых тканей крошатся и по оттаивании распадаются; 2) нельзя работать с очень мелкими объектами; 3) почти невозможно приготовить большую серию срезов, т. к. часть их всегда гибнет.— Гораздо более распространена резка кусочков тканей, заключенных в парафин или в целлоидин. При заключении в эти вещества кусочек должен быть предварительно пропитан жидкостью, которая, с одной стороны, смешивалась бы с водой, ас другой—растворяла бы парафин и целлоидин. В случае парафина для этого служат различные углеводороды и их производные: бензол, ксилол, толуол, хлороформ и др., а также различные масла. Обычно кусочек переносят сначала в 50%-ный спирт, затем в 70-э-Эб -*• 100%-ный; далее следуют смеси 100%-ного спирта с возрастающими количествами ксилола, затем чистый ксилол-•>-ксилол, насыщенный парафином (при 37°), и наконец чистый парафин (при 60°), который сменяют обычно 3—4 раза. Парафиновая заливка производится в термостате. Когда кусочек окончательно пропитался, его быстро охлаждают, так как при медленном застывании парафин кристаллизуется. До введения во всеобщее пользование парафина применялось заключение кусочков в мыло. При заливке в целлоидин объект совершенно так же проводят через спирты возрастающей крепости, затем переносят в смесь спирта с эфиром (аа) и наконец пропитывают спирто-эфирными растворами целлоидина восходящей крепости до концентрации 8%. Затем его вынимают, кладут на кусочек дерева или эбонита и переносят в сосуд с парами хлороформа; при этом целлоидин затвердевает. Далее прикрепленный к деревяшке и залитый в целлоидин кусочек погружают в 70 %-ный спирт, где он достигает плотности мягкого хряща. Залитый кусочек называется блоком. В этом сострянии объекты можно сохранять бесконечно долго без всякого.вреда для структур. Обе эти заливки требуют много времени, т. к. в большинстве сред кусочек должен лежать сутки и больше. С помощью микротома удается разложить любой кусочек на срезы от 1,« до 20 /л, не потеряв при этом ни одного. Из парафиновых блоков можно легко получать ленточки из срезов, благодаря тому, что они при резке своими краями приклеиваются друг к другу. Срезы переносят на слабо подогретую воду, на которой они легко расправляются (они не должны расплавляться). После этого срезы помещают на предметные или покровные стекла и просушивают при 37°, при чем они плотно пристают к стеклу. Перед окрашиванием парафин должен быть удален, для чего предметные стекла с приклеенными срезами погружают в ксилол (или др. вещество), в к-ром парафин растворяется; затем ксилол отмывают в 100%-ном спирте, и через спирты нисходящей крепости срезы доводятся до воды (если предполагают красить водной краской). В случае целлоидиновой заливки приготовленные срезы поступают в 70%-ный спирт и затем в воду; красят их в чашечках. Сам целлоидин в большинстве случаев окраске не мешает, а в случае нужды он легко может быть удален спиртом с эфиром. Окраска. Ее целью является отчетливое выделение различных структур. Исход окраски сильно зависит от предшествовавшей фиксации. Лучшая окрашиваемость достигается поеле спирта, формола, затем сулемы и трихлоруксусной кислоты, после же солей осмия, лучшего из известных фиксаторов, окраска нередко затруднена. Однако можно значительно облегчить окраску, обработав срез перекисью водорода, удалив так. обр. весь связанный тканью осмий, или продержав срезы в сулеме. Для удачной окраски обычно необходимо полное удаление всех следов фиксатора. Важным фактором окраски является также обработка ткани спиртом (для удаления жиров); при парафиновой и целлоидиновой заливках это достигается в процессе заливки, при резке же на замораживающем микротоме перед окраской очень рекомендуется положить срезы на нек-рое время в алкоголь. При окрашивании имеет первенствующее значение химич. строение краски, а также и метод ее применения. Не всякое окрашенное соединение есть краска, но если хромофорные группы в нем имеются (см. Анилин, анилиновые краски), то наибольшее значение имеет заряд, другими словами—реакция краски (основная или кислая); этим определяется также и метод ее применения. Некоторые краски окрашивают субстрат непосредственно. Другие краски неспособны к непосредственному действию и требуют предварительного протравления субстрата веществом, чаще всего неокрашенным, к-рое с одной стороны вступает в связь с субстратом, а с другой—собственно с краской. Т. о. получаются цветные лаки. При этом нередко сильно изменяется и цвет самой краски. В качестве протрав применяют различные соли алюминия, хрома, железа и др.; чаше всего пользуются их квасцовыми соединениями (см. Гематоксилин). Различают прогрессивную и регрессивную окраски. Прогрессивной окраской называют такую, при которой после красочной ванны препарат имеет уже окончательную степень окраски. Напр. основная краска Methylgriin в подкисленном растворе дает очень чистую окраску ядер, совершенно их не перекрашивая и не окрашивая протоплазмы. Прогрессивные окраски можно получить также и кислыми красками; они служат гл. обр. для выявления соединительнотканных волокон (это например Orcein по Unna, Fuchsin S-пикриновая кислота по ван-Гизону).—Р е-грессивная окраска всегда протекает в два стадия: 1) интенсивное и равномерное перекрашивание всего объекта и 2) ди-ференцировка препарата, которая заключается в удалении из среза излишней краски. Опыт показывает, что различные тканевые и клеточные структуры раскрашиваются неравномерно быстро; поэтому можно изолированно окрашивать какую-либо одну структуру. Пример регрессивного окрашивания—окраска железным гематоксилином по Гейденгайну. В зависимости от степени диференцировки, при этом методе можно получить окраску ядер, фибрил, клеточных оболочек, митохондрий и т. п.—Другими методами можно получить изолированную окраску эластических волокон, миелиновых оболочек нервных волокон, фибрина и т. д. Чрезвычайно распространено окрашивание препаратов во многие цвета (т. н. двойная, тройная окраска). Простейшим случаем будет диффузная докраска прогрессивно или регрессивно окрашенного препарата какой-либо кислой краской. Напр. после окраски гематоксилином, когда ядра имеют элективную синюю или черную окраску, протоплазму докрашивают кислыми красками: эозином, хромотропом и др. или смесью ван-Гизона (пикриновая кислота и фуксин). Многокрасочные препараты можно получить применяя (прогрессивно или регрессивно) смеси многих красок. Гомогенные смеси содержат либо одни кислые краски, например смесь Унна «WEP» (Wasserblau, Eosin, Phloxin), окрашивающую прогрессивно в голубой цвет—оболочки, в красный цвет—ядрышко и в тёмнокрасный—хроматин, либо одни основные, например его же смесь Methylgrun-Pyronin, применяемую регрессивно; результат окраски—зеленый хроматин, красные ядрышки и красная базо-фильная протоплазма. — Гетерогенные смеси составляются из основных и кислых красок. В качестве примеров можно привести смесь Бионди-Эрлих-Гейденгайна, состоящую из одной основной и двух кислых (Methylgriin, Fuchsin S, Orange G), и краску Гимза, составленную из двух основных и одной кислой красок (Methylenblau, Azur I, Eosin). В смеси краски не остаются индифе-рентными друг к другу, а дают соединения, легко выпадающие из раствора. Такие смеси кислых и основных красок называют иногда нейтральными смесями. Окраску можно производить не только на срезах, но и на целых кусочках ткани до заключения их в среду для резки. Т. о. получаются уже готовые окрашенные срезы. Прокрашивание кусочков можно конечно комбинировать с дополнительной до-краской срезов. Методы тотальных окрасок применяются гл. обр. при зоологических и эмбриологических работах. Наиболее излюбленной краской в этом отношении являются борный и квасцовый кармины и ге-малаун. Описанным комбинированием различных кислых и основных красок, а также протрав исчерпываются главные методы гист. окрасок. Относительно специальных методов окраски см. ниже—гистохимия. Методы импрегнации металлами не являются окрасками в собственном смысле этого слова, хотя и служат для тех же целей гистолог, и цитолог, диференцировки. Принцип импрегнации основан на том, что различные органоиды удерживают соли нек-рых тяжелых металлов в очень различной степени. Практически поступают так: кусочки помещают в растворы этих солей, а через известный промежуток времени соли восстанавливают до металла. Пример импрегнации—серебрение клеточного аппарата Гольджи (см. Голъджи метод) по Рамон-и-Кахалу (Ramon у Cajal). Методы импрегнации разработаны гл. обр. для нервной ткани (см. Нервные клетки, Белъшовского метод); они очень многочисленны и часто очень сложны, но в принципе остаются теми же. Окрашенный или импрегнированный срез должен быть заключен в просветляющуюся среду с целью пропитать препарат средой, имеющей коеф. преломления, близкий к стеклу, и устранить так. обр. лучерассея-ние. Для этого применяются: глицерин, глицерин-желатина, гумми-арабик, левулеза, различные масла; наиболее распространено заключение в канадский бальзам. Последовательность заключения препарата в канадский бальзам такова: после окраски препарат переводится через спирты возрастающей крепости в абсолютный спирт и наконец в чистый ксилол; затем на препарат наносится капля бальзама, и препарат закрывается покровным стеклом. Толщина стекла не должна превосходить 150 fi, т. к. иначе объективами микроскопа с малым фокусным расстоянием не удастся исследовать объект. Если препарат заключают в среду, растворяющуюся в воде, никаких промежуточных сред не нужно. Гумми-арабик или глицерин-желатина наносятся на срезы сразу после окраски и промывки препарата. Теоретические основы Г. т. Фиксация. Зафиксировать ткань, абсолютно ее не изменив,—задача конечно невыполнимая. Поэтому нужно стремиться зафиксировать так, чтобы структурные изменения можно было учесть. При изучении же тонких структур клетки этого достигнуть очень трудно, и поэтому желателен контроль путем прижизненного наблюдения. При фиксации, приводящей обычно к полной и необратимой коагуляции протоплазмы, всегда необходимо считаться с артефактами потому, что при этом вызывается изменение физ. состояния коллоидов клетки, при чем изменяется их дисперсность, и наступает разложение лио-фильных смешанных коллоидов. Морфологический характер коагулята протоплазмы ГИСТОЛОГИЧЕС» определяется с одной стороны ее коллоид-но-хим. свойствами, а с другой—свойствами примененного фиксатора. Т. о. микроскоп. строение фиксиров. протоплазмы является по существу артефактом и лишь в весьма условной степени отражает ее морфологию в живом виде. Вследствие этого только сравнительное изучение действия различных фиксаторов на данную протоплазму и ее строения в живом неизмененном состоянии может дать представление об ее истинной структуре. С неизбежностью таких артефактов необходимо считаться не только при оценке тончайших цитолог, наблюдений, но и в чисто гист. вопросах, т. к. под влиянием фиксаторов и последующей обработки в средах ткани могут набухать или сжиматься. Так, на основании точных измерений установлено напр. что после фиксации в жидкости Мюллера селезенка набухает на 19%, после проведения по спиртам размер ее но сравнению с исходной величиной увеличен на 10%, а после заключения в парафин она оказывается сжавшейся на 21% по сравнению с начальной величиной (В. Берг). Подобных примеров можно привести много. Поэтому крайне желателен контроль одного фиксатора другим фиксатором иного состава.— Первой группой фиксаторов являются такие, которые не вступают с тканью в химич. соединение, как напр. спирты и ацетон,мало изменяющие природу белков. Здесь коагуляция происходит в результате обезвоживания коллоидов. Сюда же может быть отнесена и термическая коагуляция—фиксация кипящей водой и высушивание мазков крови, бактерий и т. п. на пламени горелки или на медной пластинке при 120° (по Эрли-ху). Однако эти агенты применяются очень редко, так как они дают значительные артефакты (применяются гл. обр. в гематологии и бактериологии). Гораздо употребительнее фиксация путем химич. коагуляции, когда фиксатор вступает в связь с веществом ткани. Соединения эти с хим. стороны изучены мало, так как все фиксаторы введены и разработаны чисто эмпирически. Теоретически для фиксации можно употреблять все вещества, способные коагулировать белки, практически же пригодными оказываются только немногие, т. к. большинство дает слишком грубые коагуляты, разрушающие биоструктуры. Напр. соли меди совершенно не нашли себе применения в качестве фиксаторов, несмотря на то, что они очень быстро и энергично коагулируют белки. Т.о. первым требованием, к-рое предъявляется к фиксатору, является то, чтобы он давал мелкий, равномерный и компактный коагулят. Эмпирически было найдено,что лучшими фиксирующими веществами являются: осмиевая кислота, хлористая платина, хромовая кислота и двухромовокислый калий (все в подкисленном растворе). Вторым преимуществом этих веществ является их свойство фиксировать также жиры и липоиды. Это особенно важно, т. к. количество жироподобных веществ в животном организме в среднем равно 5% при 12—15% белка. Наконец третьим требованием, к-рое предъявляется к фиксатору, является его быстрое действие—быстрое умерщвление ткани и проникновение в ее глубокие слои, т.к. иначе в глубине фиксируемого кусочка происходит медленное отмирание, приводящее к распаду. Скорость проникновения фиксатора в ткани, являясь функцией скорости свободной диффузии, однако не строго пропорциональна с последней. Смешиваясь с белками, большинство фиксаторов связывается ими, и в этом случае диффузия неразрывно связана с процессами изменения физ. состояния и хим. природы фиксируемого вещества. Вследствие этого фиксатор оказывает как бы «мем-браногенное» действие, которое крайне затрудняет дальнейшее проникновение фиксатора в ткань. По мнению нек-рых особенное значение при этом имеют освобождающиеся на границе липоиды, и чем легче фиксатор их растворяет, тем быстрее идет его проникновение. С этой точки зрения получает истолкование то обстоятельство, что в большинство фиксаторов входит как обязательная составная часть уксусная к-та, легко разрушающая и поэтому удаляющая липоиды и очень быстро проникающая в ткани. Уксусная кислота как бы ведет за собой другие вещества, которые иначе проникали бы в ткани лишь с большим трудом. Конечно имеет значение и то обстоятельство, что уксусная кислота сама легко осаждает белки и поэтому, если даже фиксирующие агенты смесей имеют чисто парциальное действие, то трудно проникающие в живую протоплазму вещества значительно легче будут диффундировать в осажденный коллоид. Ниже дается таблица, в к-рой приведена сравнительная скорость проникновения фиксаторов в ткань селезенки через 12 часов воздействия при 20° (по Теллесницкому): 0,3%-ная   хлористая платина.....     0,5 мм 0,75%   »      пикриновая кислота ....     1,5 » 2%   »      осмиевая            »        ....     2,0 » 1%   »      хромовая           »        ....     2,6 » 7,5%   »      сулема...........     3,8 » 10%   »      формалин..........     2,5 » 3%   »      двухромовокислый калий .     4,6» 96%   »      спирт............     3,5 .. 5%   »      уксусная кислота.....     5,5 » 5%   »      азотная          »        .....     7,5 » Эмпирически уже давно пришли к выводу, что смеси фиксаторов действуют обычно гораздо лучше, чем одно какое-нибудь вещество. Подходя к этому вопросу со стороны скорости проникновения, приходят к тому же выводу: жидкость Флемминга (1 % Сг03— 15 ч., 2% Os04—4 ч., уксусной кислоты— 1 ч.)—4,8 мм; жидкость Теллесницкого (3% К2Сг207—100 ч., уксусн.к-ты—5 ч.)—5,5лш. С химической стороны интересно, что Os04 и К2Сг207—два лучших фиксатора, сами белка почти не осаждают, в присутствии же уксусной или др. к-ты действуют очень энергично. В жидкости Ценкера (5% HgCl2,3%K2Cr207, 1% Na2S04, 1—5% уксусной кислоты) сходную роль играет глауберова соль (ее можно заменить повар, солью), сама по себе не являющаяся ни в коей мере фиксатором. Понять ее значение можно по аналогии с процессом дубления кожи хромовыми солями . Оказывается, что при хромировании кож этой же солью (К2Сг207) добавление указанных выше солей улучшает их качество (прочность); тотальный химич. анализ при этом показывает процентное увеличение связанного хрома. Наряду с переводом одних со- единений в нерастворимое состояние фиксатор может растворять другие вещества и т. о. удаляет их из тканей. Так, до сих пор напр. не найдено ни одного способа сохранения в гнет, препарате глюкозы. Вообще при всех водных фиксаторах, когда имеют дело с животными тканями, необходимо считаться с потерей углеводов. Чтобы сохранить гликоген, употребляются фиксаторы, содержащие не менее 50% спирта, но тогда удаляются жиры и липоиды, которые имеют гораздо большее значение в смысле сохранности структуры. Жиро- и липоидо-растворяющими фиксаторами являются также уксусная к-та, хлороформ и др. В силу этого наилучшими, фиксаторами являются смеси хром-осмиевых солей, к-рые переводят в нерастворимое соединение как белки, так и липоиды. Наконец и белки могут подвергаться частичному растворению. Фиксатор, содержащий слишком много уксусной кислоты, растворит альбумины, к-рых как раз много в протоплазме. Их коагуляция лучше всего обеспечивается хромовыми солями. По той же причине совершенно не применяют в Г. т. щелочных фиксаторов благодаря их растворяющему действию на все белки. Таким образом идеального фиксатора гист. техника не знает. Чтобы получить б. или м. полную, картину строения данной ткани или клетки надо параллельно фиксировать тот же материал различными фиксаторами и затем сравнивать полученные результаты. Теория фиксации разработана очень мало. Мы знаем, что фиксация есть сложный процесс, в котором участвуют как внешние, так и внутренние факторы. В числе первых следует назвать коагулирующие свойства фиксаторов и скорость их диффузии. В числе вторых главное значение имеет природа фиксируемого объекта. Поэтому нередко фиксаторы, дающие очень хорошие результаты на одних объектах, для других почти непригодны. Неизвестно однако, почему одна фиксирующая жидкость хороша, а другая плоха. В общей форме на этот вопрос можно ответить, что все дело в способе образования и в характере коагулята. Предсказать теоретически, «хороша» или «плоха» будет фиксация какой-либо жидкостью, никогда нельзя. Это решается эмпирически. Окраска. Теории окрасок имеют весьма большое значение, так как в целом ряде случаев от них зависит морфологич. толкование препарата. В наст, время какой-либо общепризнанной теории окрасок не существует, т. к. до окончательного разрешения этих вопросов еще далеко. Все предложенные теории можно разделить на две группы: на химические и физические.—Химическая теория красочного процесса считает, что при окраске происходит настоящий хим. процесс, к-рый в простейшем случае можно выразить следующими уравнениями. I. Солянокислый Methylenblau-f ткань = =солеобразное соединение краски с тканью + NaCl. II. Тетрабромфлюоресциновый калий (эозин)+ткань=солеобразное соединение ткани с краской + KCl. В качестве доказательства этого уравнения приводят случаи окраски ткани леикосоединением (к-той) в собственный цвет краски, когда следова- тельно получают окрашенную «тканевую соль», анион же удаляется в виде натриевой или какой-либо другой соли. Авторами этой теории являются Эрлих, затем Унна, Гей-денгайн и отчасти Паппенгейм. Они считают, что в окраске первенствующее значение имеет электрохимическое полярное сродство. Отсюда возникла предложенная Эр лихом терминология: оксифилия, базофилия и нойтрофилия. В виду амфотерности белков большинство тканей может окрашиваться как кислыми, так и основными красками. Однако лишь в редких случаях основные и кислые группы уравновешивают друг друга настолько, что ткань воспринимает из гетерогенной смеси в одинаковой мере обе краски. Структур нейтрофильных мы знаем мало; в большинстве случаев окраска происходит либо основной, либо кислой краской, и тогда говорят об их базо- или окаифилии. Кроме электрополярности, в качестве другого фактора хим. сродства, имеющего, по Унна, первенствующее значение в окраске, является окисляемость тканей: Унна считает, что одни структуры обладают окисляющими, другие — восстановительными свойствами (часть структур индиферентна); первые име-ютсродство к редуцирующим веществам, вторые—к окисляющим. Различные краски также относятся к редукции и окислению небезразлично. Так, Methylgrun очень чувствителен к т. н. редуцирующим местам, к-рые его обесцвечивают (поэтому он окрашивает только богатые кислородом места). Кроме таких общих принципов хим. теории окраски выдвигались еще специфические необъяснимые сродства между тканями и красками, например между коллагеновыми волокнами и Fuchsin S. Параллельно хим. гипотезам существуют также чисто физ. теории окрасок. Теория Витта (1890), имеющая уже лишь исторический интерес, рассматривает окраски как твердые растворы. Окраска в понимании Витта происходит благодаря тому, что коеф. растворимости краски в ткани больше, чем в воде или спирте. Теория Ауербаха (1891) и др. опирается на адсорпцию. Эта теория принимает следовательно, что силой проникновения краски в ткань является диффузия, силой, удерживающей краску,—адсорп-ция, аналогичная адсорпции углем. Диффузия краски в ткани идет между ее частицами, в так назыв. «интрамицелярных пространствах». Поэтому если частицы краски малы, они диффундируют легко, если велики, они могут не пройти вовсе. Как общее правило краски цветов левой части спектра мелко дисперсны, краски правой части— грубо дисперсны. Поэтому узко-пористые ткани будут «ксантофильны» (т.е. краситься красными и желтыми красками), а широкопористые—«цианофильны» (т. е. краситься синими и фиолетовыми). Термины эти в наст. время изредка еще употребляются, но абсолютного значения не имеют. Все новейшие авторы придают процессам адсорпции первенствующее значение. Однако 35 лет тому назад Ауербах не мог еще учитывать значение заряда в процессе окрашивания и поэтому он сравнивал окраску с адсорп-цией индиферентным адсорбентом (уголь). Михаелис (1920) предложил рассматривать окраску как обмен, адсорпцию. Этим перебрасывается мост между физ. и хим. теориями, и притом в пользу последних. Михаелис принимает, что красочный процесс есть ад-сорпция, и доказывает это количественными исследованиями над удержанием краски при различных ее концентрациях. При этом были получены кривые, типичные для адсорп-ции. Адсорбентами в тканях являются белок и целлюлеза, т. е. электролитоподобные адсорбенты, к-рые можно сравнивать с каолином, тальком, гидроокисью железа и кремневой кислотой. В представлении Михаелиса в этих случаях имеется обменная адсорпция. Это надо понимать так: адсорбент никогда не бывает абсолютно чист, а на нем всегда адсорбированы различные ионы; так, каолин напр. всегда содержит ионы кальция; если профильтровать через него солянокислую метиленовую синьку, то в бесцветном фильтрате окажется хлористый кальций. Значит, ион метиленовой синьки заступил место кальция на адсорбенте, кальций же прореагировал со свободной группой хлора. Аналогичное произойдет при фильтрации через гидроокись железа, к-рая легко адсорбирует анионы (напр. С1) аммиачной соли эозина: эозин-ион останется на адсорбенте, в фильтрате же можно будет обнаружить хлористый аммоний. Эти законности Михаелис старается доказать целым рядом модельных опытов. Он напр. показал, что чем чище адсорбент, т. е. чем меньше он содержит адсорбированных ионов, тем хуже он адсорбирует. Главным выводом из его работ т. о. будет заключение, что адсорпция краски белком идет по типу солеобразующих связей. В общем это направление надо рассматривать как возвращение к представлениям Эр-лиха, но только с более глубоким пониманием происходящих процессов. Михаелис подошел к теории окраски как физико-химик. Меллендорф (Mollendorff; 1924) пересмотрел этот вопрос с точки зрения гистолога. Он не судит о силах, удерживающих краски в тканях, и занимается гл. обр. морфологией этого процесса. Меллендорф различает 2 типа окрасок: пропитывающие и осадочные. Пропитывающие окраски были им изучены гл. обр. на мышцах. Оказалось, что при их окраске не наблюдается 1) принципиальной разницы между кислыми и основными красками, 2) связи между строением краски и результатами окраски; зато наблюдается тесная зависимость между окраской и дисперсностью краски. На этом основании Меллендорф разделил все краски на 3 группы. I. Краски мо-лекулярно-дисперсные (как Orange G, Aura-min О)-—они прокрашивают всю мышцу быстро и равномерно и также легко удаляются из препарата. II. Краски высококоллоидные (как Kongorot, Baslerblau)—при прогрессивной окраске быстрее всего окрашивают в мышце пластинку Z и позднее и хуже всего — пластинку Q; при регрессивной—обратно: первой обесцвечивается Z и последней—Q. III. Полуколлоидные краски—их большинство (Eosin, Methylenblau и др.) — занимают промежуточное положение. Теоретическое объяснение пропитывающей окраски очень простое и совпадает с теорией Ауербаха. Из^ вестно, что мышечные полоски обладают различной плотностью; в силу этого коллоидные краски прежде всего проникают в наименее плотную Z, далее J->m-»-Qh и наконец Q. При раскраске перекрашенного препарата, понятно, увидим обратное—чем менее плотна структура, тем она быстрее отдает краску. Поэтому все гомогенные кислые смеси всегда составлены из красок различной дисперсности, напр. смесь ван-Гизо-на, к-рая состоит из коллоидного кислого фуксина (Fuchsin S) и молекулярно-дисперсной пикриновой кислоты. Рыхлые коллагеновые волокна окрашиваются ею в красный цвет, другие, более плотные,—в желтый. Итак пропитывающая окраска зависит от диффузии, к-рая тем быстрее, чем с одной стороны меньше дисперсность краски, а с другой— чем меньше плотность ткани. Т. о. доказывается, что в механизме окрашивания в данном случае первенствующее значение имеют физ. силы, химичность же, как замечает Меллендорф, не улавливается, если даже она имеется. Конечно относительно сил, удерживающих краску, эти наблюдения не говорят ничего. К этому нужно добавить, что Меллендорф подтвердил зависимость между окрашиваемостью и скоростью диффузии многочисленными модельными опытами по диффузии краски в желатине различной концентрации. Пропитывая субстрат, краска выявляет его структуры, как бы застревая в них. Осадочная окраска представляет собой иное явление: оказывается, что основные краски не только пропитывают ткани, но также осаждаются в виде корочки вокруг многих структур (кислого характера), создавая впечатление оболочки. Другими словами, краска сидит не только внутри структуры, но чаще и на ней. Если следить за процессом осадочной окраски, напр. на срезе хряща, то вначале видно отложение отдельных мелких зернышек по всей его поверхности, затем число зернышек быстро растет, и вскоре их скопляется так много, что они образуют сплошной слой. Морфол. картина при такой окраске является следовательно типичным артефактом; поэтому, если не знать сущности процесса, получится неправильное представление о структуре (напр. описанные различными авторами оболочки вокруг хромосом). С этой тЬчки зрения получает очень простое истолкование явление метахромазии [когда краска красит структуру не в свой цвет, напр. синий (Toluidin-blau) красит хрящ в красно - фиолетовый цвет]. Одни авторы объясняли метахрожа-зию (см.) образованием свободных оснований красок (Паппенгейм, Ганзен), а другие— их полимеризацией (Гимза, Михаелис). С точки зрения Меллендорфа метахромазия есть частный случай осадочной окраски, в к-ром изменение дисперсности, т. е. укрупнение частиц при высаждении коллоида, связано с изменением цвета. Протравные краски, по Меллендорфу, красят на основании тех же двух принципов. Осадочная окраска свойственна только краскам основным. Это объясняется тем, что в организмах мы не знаем веществ, обладающих сильно-основны- ми свойствами, к-рые могли бы энергично высаждать кислые краски, подобно тому как вещества кислого характера—нуклеопротеи-ды, хрящ и др.—высаждают краски основные. С помощью протрав однако можно добиться осадочной окраски «кислых» структур кислыми же красками, напр. гематоксилином и кармином в квасцовых растворах. Объясняется это тем, что квасцы, применяемые в Г. т., имеют всегда ясно выраженный основной характер и с кислыми красками легко дают комплексные соединения, к-рые имеют ясно выраженный основной характер. Другими словами, в данном случае происходит окрашивание не исходной краской, а новым соединением—квасцы+краска, имеющим противоположный заряд. Основным выводом из этих работ является то, что окраска определяется силами физико-хим., а не хим. порядка. Поэтому Меллендорф считает, что термины «оксифилия» и «базофилия» должны быть оставлены. «Оксифильность» свойственна всем структурам, т. к. кислыми красками !«ожно окрасить решительно все; т.о. оксифилия будет выражением пропитывания структуры кислыми красками. Понятие же базофилии заменяется понятием осадочной окраски основными красками. Очень вероятно, что на исход окрашивания сильно влияет и заряд структур (Pieschinger; 1927—28). Путем модельных опытов Пишингер показал, что накопление краски происходит по правилу Гиббса; этим доказывается, что окраска есть адсорпцион-ный процесс. Далее он показывает, что интенсивность окраски зависит от величины заряда, к-рая определяется концентрацией водородных ионов в растворе. Когда субстрат находится в газоэлектрической точке (см.), окраски не произойдет, т. к. адсорп-ция будет равна нулю. Перенося эти наблюдения на окраску гистол. препаратов, Пишингер считает возможным определить изо-электрическую точку различных структур. Технически это производится так, что одинаковые препараты окрашивают одной и той же краской в буферных растворах с различным значением рН. Величина концентрации водородных ионов, при к-рой окраска той или иной структуры не настуцает, считается ее изоэлектрической точкой; для ядер она лежит при рН = 3,3, для мышечных пластинок J—при рН = 4,8 и для ZnQnpn pH = 6,4. Исходя из величины заряда разных структур, крайне просто объяснить их различную окрашиваемость. Нужно отметить,что,исходя из этих представлений, невозможно провести грань между осадочной и пропитывающей окрасками; поэтому Пишингер такого деления не признает. Т. о. общепризнанной теории окраски в настоящее время не существует. Гистохимия. Гистохимией называют ми-кроскопическо-хим. анализ клетки и тканей. В отличие от микрохим. анализа, который представляет собой обычный хим. анализ, проделанный только с чрезвычайно малым количеством вещества (правда, и при нем часто пользуются микроскопом, но только для того, чтобы наблюдать за результатами кристаллизации), задачей гистохимии является установление хим. природы различных кле- точных включений и структур. Гистохимия разработана еще очень недостаточно; это объясняется чрезвычайной трудностью методики. В наст, время применяются только два метода: 1) метод цветных реакций и 2) метод специфических растворителей. Понятно, что круг применимых реакций ограничивается только теми, к-рые, с одной стороны, дают окрашенные продукты, не переходящие в раствор, а с другой—не разрушают морфол. структуры до неузнаваемости. Методы растворения сами по себе дают сравнительно мало и применяются главным образом как контроль к цветным реакциям. Почти все известные реакции применяются после фиксации. В качестве фиксаторов применимы только агенты, мало изменяющие природу веще-ства(спирт, ацетон, кипящая вода);смеси же, содержащие соли тяжелых металлов, б. ч. непригодны, т.к. при этом получаются трудно реагирующие соединения. Почти все реакции проделываются на срезах. В наст, время ги-стохимич. вопросы разрабатываются гл. обр. школой Унна. Унна является сторонником хим. теории окрасок, и из того факта, что все структуры можно окрасить как основными, так и кислыми красками, он делает заключение, что они построены из различных белков. Путем последовательного применения различных растворителей Унна пытается разделить белки клетки и охарактеризовать их по одиночке. Т. о. его метод заключается в комбинировании растворителей и окрасок,—отсюда название его методики «хромолиз». Методика эта раз-работанаочень тщательно. Унна представляет себе, что каждая структура клетки построена из наслоений, или, как он их называет, этажей (Stockwerk, см. схему). В своем исследовании клетки Унна исходит из окраски ее гомогенной смесью двух основных красок: Methyl-grun-Pyronin.Bo многих клетках протоплазма окрашивается в красный цвет пиронином; если же препарат был предварительно помещен на сутки в дестилированную воду, то окраска больше не удается. Отсюда Унна делает вывод, что в протоплазме имелся слой кислого белка (граноплазма= цитоза), к-рый легко растворим в воде, и, исходя из этих двух свойств (базофильности и растворимости), считает возможным идентифицировать его скислой альбумозой. Интенсивно-красное окрашивание пиронином ядрышка Унна объясняет присутствием там глобулина. Доказывается это тем, что окраска не произойдет, если препарат предварительно обработать специфич. растворителем глобулинов (2—3%-ным раствором нейтральных солей). Зеленая окраска метиловой зеленью обусловливается (по Унна) нуклеопротеидом; он легко удаляется слабой щелочью (Na2C03). По обработке препарата водой, 2%-ным NaCl и содой, из клетки удалены кислые (т. е. базофильные) белки,—об этом можно судить

//

ш Схема построения клетки по Унна:/—протоплазма; //—ядро; III—ядрышко. но тому, что Methylgriin-Pyronin в ней ничего не окрашивает. Однако ни одна структура не исчезла, следовательно остались основные (т. е. оксифильные) белки; их уже Унна не идентифицирует ни с какими определенными хим. понятиями и называет условными терминами. Для основного белка протоплазмы он употребляет термин «спон-гиоплазма» (она красится только кислыми красками); в ядре он различает два этажа: верхний—мезопластин— окрашивается гематоксилин-квасцами (кислая краска+протрава) и удаляется только 15%-ной соляной к-той; нижний—пластин (основная субстанция)—красится только кислыми красками. В связи с этим очень существенны представления Унна о кислород-образующих и кислород-потребляющих местах в клетке. Для определения этих мест свежие срезы замороженных тканей обрабатываются реактивом на кислород—Rongalitweiss, к-рый при избытке кислорода дает посинение. Rongalitweiss является метиленовой синькой, к-рая восстановлена ронгалитом (продукт конденсации формальдегида с натриевой солью сульфоксиловой кислоты). При избытке 02 метиленовая синь восстанавливается. Оказалось, что все кислые места совпадают с местами, содержащими кислород (т.е. окрашиваются этим реактивом в синий цвет), но среди них особо выделяется хроматин, к-рый воспринимает из лимфы кислород и активирует его при посредстве содержащегося в нем железа (0=0 переводится в форму—О—О—). Активированный кислород при посредстве пероксидазы хроматина (она открывается беызидиновой пробой) передается в окружающие места. Другие кислые места, окрашиваемые Rongalitweiss: гра-ноплазма, глобулин ядрышка, хрящ и др.-— только накапливают получаемый от хроматина кислород, сами же они его активировать не могут. Во всех остальных местах (мышечные волокна, нервные отростки,спон-гиоплазма, ороговевшие клетки и т. д.) кислород поглощается химически. Эти т. н. места редукции открываются на препаратах с помощью КМп04, к-рый является окислителем. Отдавая кислород, он разлагается с образованием нерастворимых окислов марганца темного цвета, которые отлагаются в местах своего образования. Методикой растворения пользовались многие авторы—Цахариас, Шварц, Мейер, Пратье и др. (Zacharias, Schwartz, Meyer, Pratje). Они дали описание процессов растворения ядра, но, в отличие от Унна, названные авторы опирались только на морфологию структур, однако окраски не рассматривали как химич. реакции и употребляли их только для того, чтобы яснее видеть происшедшие изменения. Главным недостатком этой методики с точки зрения ее хим. оценки является то, что в большинстве случаев наблюдаются процессы набухания и лишь редко происходит настоящее растворение. Набухание как таковое зависит далеко не только от хим. строения вещества, и поэтому набухаемость даже очень различных веществ может оказаться вполне одинаковой. В отношении ядра почти единственно ценным гистохим. выводом является уста- новление того, что ядрышко построено преимущественно из глобулинов. Из всех веществ наибольшее внимание было уделено нуклеопротеиду, так как его открытие имеет очень большое значение для многих цитологических вопросов. К открытию нуклеопротеида (его идентифицировали с понятием хроматин) подходили различно: 1) Цахариас и Шварц (1899—1901) дали таблицы специфических по их мнению растворителей, гл. обр. щелочей; 2) позднее применили растворение ферментами, использовав свойство нуклеопротеида перевариваться в трипсине и не изменяться в пепсине ;ван-Гер-верден (1910) предложила пользоваться нук-леазой как наиболее специфическим растворителем однако этот метод распространения не получил, т. к. до сих пор не удалось выделить этот фермент в достаточно чистом виде; 3) Унна (1912—21) открывает нуклео-иротеид с помощью хромолиза, т. е. на основании окраски его метиловой зеленью до и после различных растворителей, при этом он исходит из электрополярных свойств этой краски и чувствительности ее к редукции; 4) наконец недавно Фельгеном (Feulgen; 1924) предложена прекрасная гистохимическая реакция на нуклеиновую кислоту, так называемая нуклеальная реакция. В виду того,что нуклеиновая кислота не встречается в свободном состоянии, а только лишь в соединении с белками, то, открывая ее, этим самым открывают нуклеопротеид. Реакция основана на свойстве тимо-нуклеино-вых кислот после умеренного кислого гидролиза отщеплять пуриновые основания и освобождать альдегидные связи, в результате чего получается тиминовая кислота. Если воздействовать на нее фуксино-сернистой кислотой (бесцветное соединение), то в результате ее присоединения по месту альдегидных групп получится новое соединение темнолилового цвета. Можно считать уже установленным, что нигде кроме как в ядерном хроматине нуклеиновая кислота не содержится. Гистохимич. реакций на белок очень мало, и все они по существу являются реакциями на аминокислоты. Такими реакциями являются: реакция Миллона (открывает тирозин), диазореакция Эрлиха (тирозин и гистидин), реакция Ромье (Romieu) (триптофан) и ксантопротеиновая реакция (триптофан и тирозин). Особняком стоит нингидриновая проба, указывающая вообще на свободные аминогруппы (аминокислоты в а-положении) и введенная в гистохимию Бергом. Положительный результат реакции указывает на процессы разрушения белка в тканях. Так, Бергом описан очень интересный процесс разрушения белка в мышцах голодающих саламандр. Жиры в свободном состоянии открываются сравнительно легко; все же жироподобные субстанции, связанные с белком, наблюдению недоступны. Лучшим методом обнаружения жиров является окраска нейтр.азокрасками: Sudan III, Schar-lach R, растворенные до 40—50% в спирте. Окраска объясняется чисто физически—экстракцией краски жирами, так как коеф. растворимости ее в жирах во много раз больше, чем в спирте (распределительный коефи- циент). На том же свойстве основана окраска жиров хлорофилом и мн. др. Этими методами окрашиваются все жиры, но имеются также методы для диференциации различных жиров друг от друга. Считается, что на хромированных препаратах (этим достигается нерастворимость жиров в спирте и ксилоле, поэтому. возможна заливка в парафин) су-дан красит нейтральные жиры в красный цвет, а липоиды—в оранжево-желтый. Окрашивая препараты Nilblausulfat "ом, получают следующий эффект: нейтральные жиры—красного цвета, жирные кислоты и мыла—синие, фосфатиды—голубые, холестериновые эфиры—фиолетовые. Теория этого метода неясна. Жирные кислоты выявляются еще по методу Фишлера; он основан на их способности протравляться солями меди и давать с гематоксилином нерастворимые лаки черного цвета; нейтральные жиры к этому неспособны. Наиболее старым методом определения жира является чернение его осмиевой к-той, основанное на способности ее восстанавливаться жирами до металла или его окислов. Считается, что ненасыщенные жирные кислоты восстанавливают осмиевую к-ту уже при 15°, насыщенные—при 37°; липоиды, чтобы вычерниться, требуют кроме того большого срока.—Специально на фосфатиды имеется хороший метод Штю-лера: обработкой ткани бромистым кадмием получают трудно растворимые кадмиевые соли фосфатидов, затем кадмий выявляют путем образования гематоксилинового лака. Холестерин хорошо узнается с помощью микрополяризатора по своему двойному лучепреломлению или с помощью несколько видоизмененной Шульцем пробы Либер-мана. Реакция основана на свойстве окси-холестерина давать со смесью уксусной и серной кислот интенсивно синюю окраску. Углеводы открываются только в по-лимеризованном состоянии или в соединении с белками, т. е. в виде глюкопротеидов. До сих пор нет ни одного метода, к-рый позволил бы сохранить в препарате сахар. Методами открытия углеводов прежде всего являются эмпирически найденные окраски; аммиачный кармин Беста окрашивает гликоген; сафранин-танин, по Фишеру,—различные глюкопротеиды, гл.обр. слизи; муци-кар-мин и муци-гематоксилин, по Майеру,—муцины; Kongorot, по Бехгольду (Bechhold),— амилоид; тиониновые окраски дают мета-хромазшо всех углеводов. Поскольку однако это окраски, а не истинные реакции, они всегда требуют контроля методикой растворения. Как растворители применяются дистилированная вода, птиалин и диастаз. Необходимым контролем являются всегда еще йодные реакции (Люголевский раствор, иод-серная к-та и хлор-цинк-иод). При соединении с иодом различные углеводы дают окраски различных цветов: от коричневого до зеленого, синего и фиолетового; в силу этого возможна известная качественная ди-ференцировка их. До последних лет окрашивание углеводов иодом оценивалось как физ. явление, однако работы Эйлера, Бергмана (Euler, Bergmann) и др. показывают, что хим.трактовка гораздо более правильна. С другой стороны эмпирические наблюде- ния показывают, что кроме углеводов иод окрашивает только немногие веществарасти-тельного происхождения. Повидимому возможна окраска иодом нек-рых липоидов, но их легко исключить растворением в спирт-эфире. Все это делает реакции с иодом чрезвычайно ценными.—Уже давно предложены, гл. обр. Меккелемом (Maccallum), различные методы для открытия неорганических веществ. Разработаны методы на железо, цинк, кальций, калий, золото, висмут, хлор, фосфорную кислоту, иод, сульфаты и карбонаты. Все эти методы основаны на наиболее характерных реакциях качественного анализа. Так, железо открывается путем реакции на берлинскую лазурь (см.); эта реакция наиболее точная, все остальные не всегда дают удовлетворительные результаты. Тем не менее они оказываются иногда очень ценными. К области гистохимии относятся и так называемые реакции на окси-дазу и пероксидазу. Нитро -со Краски, употребляемые в Г. т. < тришггро-фенол=цикриновая кислота < fliiHHTpo-Ha<J>Ton=Martiiisgelb единен я ^генсаииТро-дифеннламин=АигапНа Наиболее простые но своему строению краски. Получаются прямым нитрованием и являются промежуточными продуктами для более сложных синтезов. Но своим свойствам являются резко кислыми и моле-кулярно-дисперсными красками. <диамидо-азобензол = Chrysoidin I триамидо - азобензол =Bismarck-< braun, Vesuvin Helianthin, тропеолин D, Orari-[ ge III (Orange G Bordeaux В Amarant Sudan III Scharlachrot Cerasinrot К этой группе относится наибольшее количество известных красок. Все они построены по типу: R — N:zN — R; почти все получаются так: первичный амин превращают делствисмНГГОз в диазо-соединение, на к-рое действуют амином, фенолом или их производными (реакция Грисса). Эта группа красок крайне разнообразна. В Г. т. употребляются гл. обр. краски мелкодисперсные. 1. Группа малахитовой зелени (диамидо-дериваты три-фенил-метана) Амидо-азо-соединения окси-азо-соединения gffi • 2 з т а ч as S я й ^ SO , Группа розанилина (три-амидо-дериваты трифенил-метана) 3. Группа фталеина I Malacbitgrun BriHaritgriln (Fuchsin R Fuchsin S Metliylviolett Methylgriin Jodgriln Anilinblau Wasserblau /Fluorescein I (Uranin) " Eosin I Erythrosin I Phloxin Очень разнообразная группа красок как по своим свойствам, так и по методам получения. К этой группе принадлежат лучшие основные прогрессивные ядерные краски. Употребляемые в Г. т. кислые краски группы розанилина обладают ясно выраженными коллоидными свойствами и применяются в гомогенных смеся* для окраски волокон. Группа фталеина представлена исключительно кислыми красками; они применяются для докраски протоплазмы—красят рав номерно и очень интенсивно. {Thionin Methylenblan Toluidinblau Azur I Neutralrot {Safranin G Janusgriiii Magdalarot Производные ) хинонимида эиродины: сафранины ( Nigrosin (Indulin 3B индулины Краски из группы тиааинов, применяемые в Г. т., очень близки между собой. Их наиболее важным свойством является способность к очень ясной красной метахромакии; их ортохроматический цвет — синий. Все они широко употребляются для изготовления сложных комплексных гетерогенных смесей (как-то: Гимза, Май-Грюнвальд и многие др.), обладающих большой полихромностью. Азиновая группа по своим свойствам очень разнообразна. Индиго — индигЪ-кармин — индигово-серпокислый патрий. Эта краска употребляется как кислая коллоидная краска для окраски волокон, а также для прижизненного введения в организм. Органические краски мало- ( кармин известного строения гематоксилин Кармин является продуктом кошенили, которая добывается из высушенных самок насекомого Coccus cacti (Мексика). Употребляется только в соединении с протравами, т. е. в виде лака; дает наиболее прочные невыцветающие окраски. Гематоксилин—краска кислая—добывается из древесины дерева Haemato-xylon campechianum (Мексика, Ямайка и др.). Сам по себе не красит; с протравами дает прекрасные окраски темного цвета. Лит.: Мясоедов С, Руководство к практическим занятиям по гистологии, Л., 1925; Н и к и-ф о р о в М., Микроскопическая техника, М., 1919; Шуенинов С, Техника патолого-гистологического исследования, П., 1916; Кульчицкий II., Учение о микроскопе и техника микроскопического исследования, Харьков, 1909; В е i t z k e H., Краткое руководство по методике патолого-гистологиче-ского исследования, Берлин (без года); Enzyklopiidie der mikroskopischen Technik, hrsg. von R. Krause, B. I—III, В.—Wien, 1926—27; Die mikroskopische Un-tersuchung der lebendigen Masse u. ihre Ergebnisse (Hndb. der mikroskopischen Anatomie des Menschen, hrsg. v. W. Mollendorff, B. I, В., печ.); R о m e i s В., Taschenbuch der mikroskopischen Technik, Munchen, 1928; Mi с h a e 1 i s L., Der heutige Stand der all-gemeinen Theorie der histologischen Farbung, Archiv f. mikroskopische Anatomie, B. XCIV, 1920; Mollendorlf W. u. M., Durchtrankungs- und Wi-derschlagsfarbung als Haupterscheinungen bei der hi-stologischen Farbung, Ergebnisse der Anatomie u. der Entwicklungsgeschichte, B. XXV, 1924; Schmorl G., Die pathologisch-histologischen Untersuclmngsme-thoden, Lpz., 1925; Beylot M. et Baudri-m о n t A., Cahier de travaux pratiques d"histologie, Paris, 1926.                                                  E. Вермель.
(Медицинский справочник / Медицинская энциклопедия), Медицинский справочник, Медицинская энциклопедия, вики, wiki, Медицинская энциклопедия, Медицинский справочник

ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА - ГИСТОЛОГИЧЕСКАЯ ТЕХНИКА - Медицинская энциклопедия | Медицинский справочник